利用熒光光度計(jì)進(jìn)行熒光分析的方法稱為分子熒光光度法。它的測(cè)試原理同紫外分光光度法，只是它檢測(cè)的是熒光，即它檢測(cè)的是熒光增白劑的分子經(jīng)紫外光激發(fā)后發(fā)射出較激發(fā)光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的熒光。熒光增白劑的熒光光譜反映了熒光增白劑的特性，不同的熒光增白劑具有相對(duì)固定的激發(fā)波長(zhǎng)和熒光光譜，因此熒光光度法也是熒光增白劑分析中的一種重要方法。

具體的方法為:①配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液;②在較合適的激發(fā)波長(zhǎng)下測(cè)量不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度，以此在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;③配制待測(cè)樣品的溶液，濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度要相近;④在與②相同的條件下測(cè)定待測(cè)樣品的熒光強(qiáng)度，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得其原始濃度，根據(jù)待測(cè)樣品的質(zhì)量可推算出該樣品的純度或商品的強(qiáng)度。

采用這種方法需要注意的是，熒光光度計(jì)的靈敏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于吸收光譜的分光光度計(jì)，因而測(cè)試時(shí)所需要的樣品濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于測(cè)試紫外光譜時(shí)的濃度，一般為后者濃度的1/100~1/1000。濃度過高時(shí)，熒光物質(zhì)的發(fā)光強(qiáng)度由于濃度猝滅效應(yīng)反而低于它在濃度較稀時(shí)的強(qiáng)度81.